| 赵飞骏，张晓红，余坚，刘双全，曾铁兵，张跃军,吴移谋.梅毒螺旋体Gpd-IL-2融合基因原核表达重组体的构建、表达及免疫活性的初步研究.[J].中南医学科学杂志.,2012,40(2):131-135. |
| 梅毒螺旋体Gpd-IL-2融合基因原核表达重组体的构建、表达及免疫活性的初步研究 |
| Expression and Identification of Gpd-IL-2 Recombinant Protein of Treponema Pallidum and Its Immuno-Competence Analysis |
| 投稿时间：2011-10-27 |
| DOI： |
| 中文关键词: 梅毒螺旋体 Gpd IL-2 融合表达 免疫原性 |
| 英文关键词:Treponema pallidum (Tp) Gpd IL-2 fusion expression immuno-competence |
| 基金项目:湖南省科技厅重点课题（2010FJ2008）,湖南省自然科学省市联合基金（11JJ9023）,湖南省自然科学基金青年基金（11JJ4076）,湖南省科技厅项目（2011tt2014） |
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| 中文摘要: |
| 目的以梅毒螺旋体（Tp）外膜蛋白基因Gpd及细胞因子佐剂IL-2为目的基因，融合构建原核表达重组体pET28a/Gpd-IL-2，表达鉴定并进行免疫活性的初步分析，为进一步开展Tp疫苗动物实验打下基础。方法定向克隆构建原核表达重组体pET28a/Gpd-IL-2进行诱导表达；Ni亲和层析纯化重组融合蛋白后，Western blot检测其免疫反应性；免疫新西兰兔评价重组蛋白的免疫原性。结果成功构建原核表达重组体pET28a/Gpd-IL-2，表达鉴定及纯化获得相对分子量约为60 kDa的融合蛋白；Western blot检测其能与梅毒阳性血清发生特异性结合，说明两融合基因之间的表达相互没受到太大影响；纯化的Gpd-IL-2重组蛋白免疫新西兰兔能诱导其产生特异性免疫应答，ELISA检测免疫血清中特异性抗体滴度在1∶6 400以上。结论Gpd-IL-2融合基因重组蛋白具有良好的免疫活性，这为进一步开展Tp疫苗动物实验条件的优化打下一定的基础。 |
| 英文摘要: |
| ObjectiveExpression and Identification of Gpd-IL-2 recombinant protein of Treponema pallidum and its immuno-competence analysis.MethodsThe target genes encoding Gpd and IL-2 were subsequently cloned into the expression plasmid pET28a (+)，and expressed in E.coli Rosseta.Its immunogen was analysed by Western blotting and ELISA after New Zealand White rabbits were immunized by three subcutaneous inoculations of Tp Gpd recombinant protein. |
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