叶裕良,兰爱平,林琳,袁福利,周舸,张莉莉,莫利求,陈培熹,冯鉴强.谷氨酸转运体-1在H2S保护PC12细胞对抗化学性低氧损伤中的作用.[J].中南医学科学杂志.,2011,39(4):380-384. |
谷氨酸转运体-1在H2S保护PC12细胞对抗化学性低氧损伤中的作用 |
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投稿时间:2011-05-30 |
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中文关键词: 谷氨酸转运体-1 硫化氢 PC12细胞 活性氧 低氧 |
英文关键词: |
基金项目:广东省科技计划资助项目资助(2010B080701035,2008B080703053). |
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中文摘要: |
目的探讨谷氨酸转运体-1(GLT-1)在硫化氢(H2S)保护PC12细胞对抗化学性低氧损伤中的作用。方法应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞建立化学性低氧损伤模型作为研究对象。实验分为6组,正常对照组:未经任何药物处理的PC12细胞;CoCl2处理组:PC12细胞用600 μmol/L的CoCl2处理24 h或48 h;H2S单独处理组;H2S预处理组:400 μmol/L NaHS(H2S的供体)提前30 min 作用PC12细胞,然后与CoCl2一起再作用24 h或48 h;DHK(一种GLT-1抑制剂)单独处理组;DHK阻断组:在NaHS预处理前30 min,给以 400 μmol/L DHK,然后按H2S预处理组继续处理。应用蛋白免疫印迹法(Western bolt)检测GLT-1蛋白表达;CCK-8比色法测定细胞存活率;Hoechst33258核染色法检测细胞凋亡的形态学改变及数量改变;罗丹明123(Rh123)染色及荧光显微镜照相测定线粒体膜电位(MMP)。结果600 μmol/L CoCl2处理PC12细胞24 h可使GLT-1表达明显减少;在CoCl2处理PC12细胞前应用400 μmol/L NaHS预处理30 min能明显地阻断CoCl2对GLT-1表达的抑制作用;400 μmol/L 的GLT-1抑制剂DHK能阻断H2S保护PC12细胞对抗CoCl2诱导的损伤作用,使细胞存活率降低,凋亡细胞数量及MMP丢失增多。结论上调GLT-1表达可能是H2S保护PC12细胞对抗CoCl2损伤的作用机制之一。 |
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