| 涂剑,吴海燕,姚志红,朱炳阳,唐圣松.M-CSF胞质内稳定表达细胞系的构建和鉴定.[J].中南医学科学杂志.,2009,(2):. |
| M-CSF胞质内稳定表达细胞系的构建和鉴定 |
| Construction and Identification of M-CSF Stably Expressing Cell Line in Cytoplasm |
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| DOI： |
| 中文关键词: 巨噬细胞集落刺激因子 靶向定位载体 HeLa细胞 胞质 |
| 英文关键词: |
| 基金项目:湖南省杰出中青年专家专项基金? |
| 涂剑 吴海燕 姚志红 朱炳阳 唐圣松 |
涂剑,姚志红,朱炳阳,唐圣松(南华大学,药物药理研究所,湖南,衡阳,421001)
;吴海燕(南华大学,药物药理研究所,湖南,衡阳,421001;郴州市第一人民医院,病理科)
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| 中文摘要: |
| 目的 构建真核细胞pCMV/cyto/myc-M-CSF载体,建立M-CSF胞质内稳定表达细胞系,为进一步研究M-CSF的胞内作用奠定基础. 方法 构建靶向定位载体pCMV/cyto/myc-M-CSF,PCR及双酶切鉴定后转染HeLa细胞,G418筛选阳性克隆,RT-PCR和免疫细胞化学鉴定M-CSF的表达及M-CSF的蛋白定位. 结果 重组质粒pCMV/cyto/myc-M-CSF用M-CSF特异性的引物进行PCR扩增,结果 显示插入片段约为1 400 bp,双酶切后分别得到约5.0 kb和1 400 bp的两条带,M-CSF分子大小与预期一致.RT-PCR、免疫细胞化学结果 表明转染M-CSF的HeLa细胞高表达M-CSF(P<0.05),并且转染M-CSF的HeLa细胞表达的M-CSF蛋白定位于细胞质. 结论 成功构建了稳定高表达胞质M-CSF的HeLa细胞系. |
| 英文摘要: |
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