| 唐保东,刘思纯,张常然,徐雅.人类DLK1基因的克隆、表达、纯化及抗体制备.[J].中南医学科学杂志.,2007,(6):820-822,825. |
| 人类DLK1基因的克隆、表达、纯化及抗体制备 |
| Prokaryotic Expression and Purification of the Human DLK1 Gene and Preparation of Its Polyclonal Antibody |
| 投稿时间：2007-04-21 |
| DOI： |
| 中文关键词: 人类DLK1基因 原核表达 多克隆抗体 人类 基因 克隆 表达纯化 抗体制备 Polyclonal Antibody Preparation Gene Human Expression and Purification 作用 肝肿瘤 重组蛋白纯化 表达载体的构建 原核 抗体滴度 蛋白免疫 重组表达载体 结果 检测 |
| 英文关键词:human DLK1 gene prokaryotic expression polyclonal antibody |
| 基金项目: |
| 唐保东 刘思纯 张常然 徐雅 |
| 中山大学第一附属医院黄埔院区消化内科,广东广州510080 |
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| 中文摘要: |
| 目的 构建人类DLK1基因的原核表达载体,表达并纯化蛋白,制备多克隆抗体,为研究DLK1基因的功能奠定基础.方法 从GenBank中下载人类DLK1基因全长cDNA序列并针对不合信号肽的编码序列设计引物,应用RT-PCR获得目的片段,重组入原核表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达,应用亲和层析法获得重组DLK1蛋白免疫大鼠制备多克隆抗体,用ELISA检测抗体滴度.结果 成功构建了DLK1基因重组表达载体pET-28a-DLK1,表达的重组蛋白纯化经SDS-PAGE鉴定后免疫大鼠,得到了高滴度的多克隆抗体.结论 成功的原核表达载体的构建、重组蛋白的表达纯化及多克隆抗体的制备为进一步研究DLK1基因的功能及其在肝肿瘤中的作用提供了基础. |
| 英文摘要: |
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