吴艳,王晓娟,刘小敏,曾春亚,梁晓秋.新抑癌基因PIG11高表达HepG2细胞株的建立.[J].中南医学科学杂志.,2007,(5):653-655. |
新抑癌基因PIG11高表达HepG2细胞株的建立 |
Recombinant PIG11 Gene Retroviral Vector Construction and Its High Expression in HepG2 Cells |
修订日期:2007-05-08 |
DOI: |
中文关键词: PIG11 逆转录病毒载体 HepG2细胞株 新抑癌基因 表达 细胞株 Cells Expression High Construction Retroviral Vector Gene 生物学行为 mRNA 发现 检测 上清 Genbank 编码序列 测序分析 结果 感染 病毒 |
英文关键词: |
基金项目: |
吴艳 王晓娟 刘小敏 曾春亚 梁晓秋 |
吴艳(南华大学,肿瘤研究所,湖南,衡阳,421001) ;王晓娟(南华大学,肿瘤研究所,湖南,衡阳,421001) ;刘小敏(南华大学,肿瘤研究所,湖南,衡阳,421001) ;曾春亚(南华大学,肿瘤研究所,湖南,衡阳,421001) ;梁晓秋(南华大学,肿瘤研究所,湖南,衡阳,421001)
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中文摘要: |
目的 构建人PIG11逆转录病毒载体,建立高表达PIG11基因的HepG2细胞,为进一步研究PIG11基因在肝癌细胞中的功能提供一个理想的试验平台.方法 将已有的peDNA3.1/NT-GFP-PIG11质粒用PCR法扩增出PIG11片段,构建含人PIG11 cDNA的重组质粒pLXSN-PIG11.重组载体经PCR鉴定和DNA测序分析.将该重组质粒用lipofeetamineTM2000转染包装细胞PA317,获得pLXSN-PIG11逆转录病毒.用病毒感染HepG2细胞,获得PIG11高表达的HepG2细胞株.结果 获得384 bp人PIG11基因,测序证明PIG11cDNA编码序列与Genbank中报道的一致,转染PA317细胞后用病毒上清感染HepG2细胞,经RT-PCR检测发现HepG2细胞中PIG11 mRNA表达明显升高.结论 成功构建了高表达PIG11基因的HepG2细胞株,为进一步研究其生物学行为奠定了基础. |
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