| 陈春莲,彭俊,余敏君,尹卫国,朱翠明,万艳平.GFP-HPVl8 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定.[J].中南医学科学杂志.,2007,(5):643-645. |
| GFP-HPVl8 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定 |
| Construction and Identification of Eukaryotic Expression Vector for Mutant of HPV 18 E2 Fused with GFP |
| 投稿时间：2007-03-11 |
| DOI： |
| 中文关键词: 人乳头瘤病毒 E2基因 绿色荧光蛋白 真核表达 删除 突变体 融合蛋白 真核表达载体 构建与鉴定 Mutant Eukaryotic Expression Vector Identification 完全 读码框 移码突变 碱基错配 基因片段 重组质粒 显示 分析 BLAST 序列 GenBank 测序鉴定 |
| 英文关键词:HPV E2 gene GFP eukaryotic expression |
| 基金项目:湖南省自然科学基金 |
| 陈春莲 彭俊 余敏君 尹卫国 朱翠明 万艳平 |
| [1]南华大学病原生物学研究所,湖南衡阳421001 [2]桂林医学院附属医院内科,湖南衡阳421001 |
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| 中文摘要: |
| 目的 构建人乳头瘤病毒18型早期蛋白2(HPV18 E2)删除突变体N端(TAD)、C端(DBD)与增强型绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的真核表达载体,为研究HPV18 E2基因与宫颈癌发生的关系提供实验基础.方法 用PCR扩增HPV18 E2 TAD、DBD基因序列,用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切pEGFP-Cl载体与TAD、DBD基因PCR产物,纯化回收后,用连接酶连接并转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定.结果 阳性克隆质粒经双酶切后,琼脂糖凝胶电泳可见4.7 kb、618 bp和243 bp附近的片段.DNA测序结果经与GenBank登录的序列做BLAST分析,显示重组质粒分别含有618 bp与243 bp的目的基因片段,无碱基错配和移码突变,读码框完全正确.结论 成功地构建了GFP-HPV18 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体pEGFP-C1/TAD与pEGFP-C1/DBD. |
| 英文摘要: |
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