| 朱翠明,吴移谋,余敏君.穿透支原体P35蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定.[J].中南医学科学杂志.,2005,(1):33-36. |
| 穿透支原体P35蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定 |
| Expression and Identification of Mycoplasma Penetrans 35kDa Lipoprotein |
| 修订日期：2004-11-08 |
| DOI： |
| 中文关键词: 穿透支原体 P35 表达 |
| 英文关键词:Mycoplasma penetrans,P35,expression |
| 基金项目:湖南省卫生厅资助课题 (Y0 2 -0 66)，湖南省教育厅资助课题 ( 0 1C197) |
| 朱翠明 吴移谋 余敏君 |
| 南华大学微生物学与免疫学教研室,湖南衡阳421001 |
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| 中文摘要: |
| 目的为研究穿透支原体(Mpe)35 kD脂质相关膜蛋白(P35)的生物学活性,构建其原核细胞表达载体,并在大肠杆菌(E.coli)中表达.方法 PCR扩增p35基因片段,克隆至pQE31载体, 用PCR介导的突变将p35基因中两个“TGA”终止密码子定点突变为“TGG”,使其在E.coli中编码表达色氨酸.IPTG诱导pQE31/P35在E.coli 中表达目的蛋白rP35,经Ni-NTA Spin亲和纯化, Western blot分析鉴定表达产物. 结果 PCR扩增出约1kb的DNA片段,克隆至pQE31载体,筛选到阳性克隆pQE31/P35,测序分析 p35基因中两个“TGA”终止密码子成功突变成“TGG”. IPTG诱导pQE31/p35在E.coli 中表达分子量约37.4 kD的蛋白质,Western blot分析鉴定其为rP35. 结论构建的pQE31/p35原核表达载体,在E.coli中成功地表达rP35. |
| 英文摘要: |
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