严加林,吴移谋,赵飞骏,刘双全.海毒螺旋体外膜蛋白Gpd的基因型分析及其重组蛋白的免疫原性鉴定.[J].中南医学科学杂志.,2005,(1):29-33. |
海毒螺旋体外膜蛋白Gpd的基因型分析及其重组蛋白的免疫原性鉴定 |
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DOI: |
中文关键词: 梅毒螺旋体 Gpd基因 原核表达 |
英文关键词: |
基金项目: |
严加林 吴移谋 赵飞骏 刘双全 |
[1]南华大学第二附属医院,湖南衡阳421001 [2]南华大学医学院病原生物学研究所,湖南衡阳421001 |
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中文摘要: |
目的构建梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)外膜蛋白Gpd基因的原核表达载体,检测其表达产物的免疫原性,并比较梅毒螺旋体各菌株Gpd基因序列的同源度。方法 从Tp Nichols株基因组模板中PCR扩增Gpd基因,与 GenBank登录的序列做blast比较,定向克隆构建原核表达重组体pET28b( )-Gpd,转入大肠杆菌ril表达菌,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达,Western-blot检测重组蛋白的免疫原性。结果 载体上所连目的基因片段序列与GenBank登录的Nichols株Gpd基因序列完全一致,同其他病原性密螺旋体菌株登陆序列比较同源度为98%~100%。SDS-PAGE检测诱导产物显示有一Mr约为41 kDa的特异蛋白带,免疫印迹技术检测其能与梅毒阳性标准血清反应。结论 Tp原核表达重组体pET28b( )-Gpd成功构建,且能够在ril表达菌中融合表达,为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了一定的实验基础。 |
英文摘要: |
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