严加林,吴移谋,赵飞骏,刘双全.梅毒螺旋体外膜蛋白Gpd的基因型分析及其重组蛋白的免疫原性鉴定.[J].中南医学科学杂志.,2005,(1):29-32. |
梅毒螺旋体外膜蛋白Gpd的基因型分析及其重组蛋白的免疫原性鉴定 |
Construction of the Expression System for Gpd Gene From Treponema Pallidu and Antigenicity Identification of the Recombinant Protein |
修订日期:2004-10-27 |
DOI: |
中文关键词: 梅毒螺旋体,Gpd基因,原核表达 |
英文关键词:Treponema pallidum,Gpd gene,procaryotic expression, |
基金项目:湖南省教育厅重点资助项目 ( 0 0 2A0 46),湖南省卫生厅科研基金 (B2 0 0 3 -0 85 ) |
严加林 吴移谋 赵飞骏 刘双全 |
南华大学第二附属医院,南华大学医学院病原生物学研究所,南华大学医学院病原生物学研究所,南华大学医学院病原生物学研究所 湖南衡阳421001,硕导,教授 |
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中文摘要: |
目的 构建梅毒螺旋体 (Treponemapallidum ,Tp)外膜蛋白Gpd基因的原核表达载体 ,检测其表达产物的免疫原性 ,并比较梅毒螺旋体各菌株Gpd基因序列的同源度。方法 从TpNichols株基因组模板中PCR扩增Gpd基因 ,与GenBank登录的序列做blast比较 ,定向克隆构建原核表达重组体pET2 8b( + ) -Gpd ,转入大肠杆菌ril表达菌 ,SDS -PAGE分析重组蛋白的表达 ,Western -blot检测重组蛋白的免疫原性。结果 载体上所连目的基因片段序列与GenBank登录的Nichols株Gpd基因序列完全一致 ,同其他病原性密螺旋体菌株登陆序列比较同源度为 98%~ 1 0 0 %。SDS -PAGE检测诱导产物显示有一Mr约为 41kDa的特异蛋白带 ,免疫印迹技术检测其能与梅毒阳性标准血清反应。结论 Tp原核表达重组体pET2 8b( + ) -Gpd成功构建 ,且能够在ril表达菌中融合表达 ,为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了一定的实验基础。 |
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