刘革修,张彤,吴孟津.人表皮生长因子cDNA序列分析及其在大肠杆菌中的表达.[J].中南医学科学杂志.,1997,(2):. |
人表皮生长因子cDNA序列分析及其在大肠杆菌中的表达 |
Cloning Sequencing and Expression of the Human EGF Structural Gene in E. coli |
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DOI: |
中文关键词: 表皮生长因子,原核表达 |
英文关键词:epidermal growth factor,recombinant expression |
基金项目:国家自然科学基金!39470809 |
刘革修 张彤 吴孟津 |
衡阳医学院分子生物学中心!衡阳,421001 |
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中文摘要: |
应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR法)从人脐静内皮细胞RNA中扩增了表皮生长因子(EGF)的cDNA,采用基因重组技术克隆到pGEM-3zf(+)载体中,经全自动荧光测序仪测定了其序列。在PCR扩增引物上分别加有起始密码子(ATG)和终止密码子(TGA),以利于原核表达。经亚克隆,EGFcDNA克隆到表达载体pBV220的EcoRI、SmaⅠ位或上,在大肠杆菌DH5α中进行表达。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳表明其表过量约占菌体总蛋白的10%。 |
英文摘要: |
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