| 陈章国,万艳平,马大龙,宋泉声,狄春辉,肖波,张颖姝.用点突变PCR方法去除人IL－2cDNA表达克隆终止密码及其鉴定.[J].中南医学科学杂志.,1995,(2):. |
| 用点突变PCR方法去除人IL－2cDNA表达克隆终止密码及其鉴定 |
| Deleting stop Codon of Human IL-2 cDNA Expression Clone through Side Mutation PCR and Identification |
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| DOI： |
| 中文关键词: hIL－2 终止密码 位点突变 PCR |
| 英文关键词:IL-2 cDNA,stop codon,site mutation,PCR |
| 基金项目:湖南省自然科学基金 |
| 陈章国 万艳平 马大龙 宋泉声 狄春辉 肖波 张颖姝 |
| 衡阳医学院分子病毒学实验室，北京医科大学医学免疫学国家重点实验室 |
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| 中文摘要: |
| 在重组人ＩＬ－２（ｈＩＬ－２）大肠杆菌高效表达的基础上，为了构建ｈＩＬ－２与别的目的蛋白的嵌合分子，我们利用点突变ＰＣＲ方法去除ＩＬ－２ｃＤＮＡ表达克隆的终止密码，并构建成ｈＩＬ－２嵌合重组蛋白表达克隆，在大肠杆菌中表达的ＩＬ－２嵌合重组蛋白具有天然ＩＬ－２分子的生物活性。本文结果表明点突变ＰＣＲ去除ｃＤＮＡ终止密码的方法效率高、快速、简便。 |
| 英文摘要: |
| On the basis of over-expression of recombinant hIL-2 in E. coli,in order to construct multifunction chimeric molecules of IL-2 and other interest proteins,we deleted the stop codon of hIL-2cDNA expression clone through site mutation directed by PCR. The hIL-2 cDNA without stop codon was recombined with expression vector pKPL,constructed into expression clone pKPL-mhIL-2, which could over-expressed a chimeric recombinant protein of IL-2.The results here showed that the side mutation PCR method was rapid, convenient and high efficient for deleting stop codon of cDNA. |
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